PadginTeb , Department of Education

بخش آموزش پادگین طب

Homeمقالات آموزشیانواع روشهاي سنجش ايمني آنزيم دار

انواع روشهاي سنجش ايمني آنزيم دار

انواع روشهاي سنجش ايمني آنزيم دار:

1- EIA رقابتي براي آنتي ژن: در اين روش آنتي ژن کونژوگه و آزاد بر سر اتصال به آنتي بادي مشترک با يکديگر رقابت مي کنند. پس از جداسازي کمپلکس آنزيم دار از کونژوگه آزاد، فعاليت آنزيمي مبناي سنجش قرار مي گيرد. در اينجا نيز رابطه معکوس ميان کمپلکس آنزيمي و آناليت آزاد وجود دارد.

ابتدا واکنش آنزيمي مربوط به کمپلکس آنزيمي در حضور مقادير معيني از آناليت آزاد (استانداردها) بررسي شده، محور x ها نشاندهنده غلظت آناليت آزاد و محور y ها مؤيد فعاليت کمپلکس آنزيم دار بر حسب جذب نوري (OD) مي باشند. منحني استاندارد نزولي رسم شده و بر اساس آن ميزان آناليت در نمونه هاي مجهول سنجيده مي شود.


2- IEMA براي آنتي ژن: ابتدا آنتي ژن با مقادير مازاد آنتي بادي نشاندار واکنش مي دهد سپس مقادير مازاد آنتي ژن تثبيت شده به محيط افزوده مي شود تا مابقي آنتي بادي وارد واکنش شود با جداسازي آنتي شده و سنجش فعاليت آنزيمي متصل به آنتي ژن محلول، مي توان ميزان آنتي ژن را مشخص کرد. در اينجا نيز سيستم رقابتي نبوده، ميزان فعاليت آنزيمي مشاهده شده با ميزان آناليت آزاد رابطه مستقيم دارد.

3- IEMA ساندويچي براي آنتي ژن: در اين روش آنتي ژن يا آناليت مذکور بايد حداقل دو شاخص آنتي ژنيک مجزا و دور از هم داشته باشد. آنتي ژن طي يک و يا در مواردي دو مرحله توسط آنتي بادي اول و آنتي بادي کونژوگه دوم ساندويچ مي شود. پس از جداسازي آنتي بادي کونژوگه آزاد که در واکنش شرکت نکرده، فعاليت کمپلکس ساندويچي آنزيم را اندازه گيري مي کنند. در اين واکنش نيز به ازاي هر آناليت يک ساندويچ آنزيم دار تشکيل شده، رابطه مستقيم بين ميزان آناليت و فعاليت کمپلکس آنزيم دار وجود دارد.


4- IEMA ساندويچي براي آنتي بادي: در اين روش آنتي بادي مورد سنجش بين آنتي ژن تثبيت شده و آنتي بادي دوم عليه آنتي بادي مورد سنجش ساندويچ مي شود. آنتي بادي دوم با آنزيم نشاندار شده است. پس از انکوباسيون و شستشو فعاليت ساندويچ آنزيم دار را با افزودن سوبستراهاي مناسب آنزيم اندازه گيري مي کنند و ميزان فعاليت آنزيم با غلظت آنتي بادي مورد سنجش رابطه مستقيم دارد.


5- الايزاي هوموژن: همانطور که اشاره شد نياز به اندازه گيري روزمره و تعداد بالاي برخي درخواست ها، بحث اتوماسيون را مطرح نمود. يکي از شرايط کمک کننده براي اتوماسيون هوموژن بودن سيستم است، يعني سيستم سنجش نيازي به مراحل جداسازي مانند سانتريفوژ کردن ندارد و فعاليت آنزيم بر خلاف راديواکتيويته مي تواند در حالت آزاد و متصل متفاوت باشد، مثلاً اتصال آنتي ژن به آنتي بادي سببب فعاليت و يا مهار فعاليت آنزيم متصل به کمپلکس گردد، لذا نيازي به مرحله جداسازي نيست.


6- ساير روش هاي الايزا: در سيستمهاي الايزا مي توان آنتي بادي آنزيم دار و آنتي بادي آزاد را در اتصال به آنتي ژن به رقابت گذاشت يا آنتي بادي و آنتي ژن آنزيم دار را وارد واکنش نمود و سپس آنتي بادي تثبيت شده را جهت جمع آوري آنتي ژن آنزيم دار مازاد به محيط افزود و پس از جداسازي، فعاليت آنزيمي را در محلول يا در فاز تثبيت شده مورد سنجش قرار داد. در حالت اول رابطه مستقيم و در حالت دوم رابطه معکوس مي باشد.

2929 بازدید

About the author

شرکت تامین مواد مورد نیاز در آزمایشات تشخیصی

تازه های آموزش

آمار بازدیدکنندگان

Today140
Yesterday385
This week1313
This month6130
Total289043

  • IP: 54.80.188.87

Who Is Online

2
Online

پنج شنبه, 26 مهر 1397 11:23

موقعیت مکانی

با ما در تماس باشید

تهران,خیابان شریعتی,خیابان خواجه عبدالله انصاری,خیابان ابوذر شمالی,پلاک 60,طبقه چهارم واحد 16